Левин инструкция по применению. Питательные среды Раппопорта, Эндо, Левина, Рессела, Клиглера: тип среды, состав, назначение, принцип действия

Левина среда Левина среда

(лактозоэозинметиленовый агар) - дифференциально-элективная среда для выделения энтеробактерий. Позволяет отличить лактозоферментирующие (образуют темно-синие или черные колонии) от неферментирующих лактозу к-р (колонии цвета среды). Протей формирует изолированные оранжевые колонии. Среду готовят добавлением к 100 мл 1,5% МПА, рН 7,2 - 7,4, 2 мл 0,5% водного р-ра метиленового синего, 1,5 мл 2% р-ра эозина, 2 г лактозы и 0,2 г двухосновного калия фосфата, затем разливают ее по чашкам Петри. Среда имеет светло-фиолетовый цвет. Промышленность выпускает сухой препарат, к-рый готовят по указанию на этикетке. Вариант Л.с. -лактозобромти-моловая среда- не обладает ингибирующими св-вами против клебсиелл склеромы.

(Источник: «Словарь терминов микробиологии»)

- (М. Levine, род. в 1889 г., амер. бактериолог) плотная дифференциально диагностическая питательная среда для выявления не разлагающих лактозу патогенных бактерий сем. Enterobacteriaceae (возбудителей брюшного тифа, дизентерии и др.); состоит из… … Большой медицинский словарь

- (ые) (ы) искусственный субстрат, представляющий собой сбалансированную смесь питательных веществ в концентрациях и сочетаниях, необходимых для роста и деления микроорганизмов или клеток высших организмов. Питательная среда Адамса см. Адамса… … Медицинская энциклопедия

См. Левина среда … Большой медицинский словарь

См. Левина среда (Источник: «Словарь терминов микробиологии») … Словарь микробиологии

- (тетрабромфлюоресцеин) краситель (см. Красители) красного цвета и флюорохром зеленовато желтого цвета. Растворим в воде и этаноле. Применяют для крашения цитоплазмы и составе краски Романовского Гимзы, а также как ингибитор некоторых бактерий в… … Словарь микробиологии

У этого термина существуют и другие значения, см. Детская музыкальная школа № 1. Детская музыкальная школа №1 г. Пензы … Википедия

Культурологи ческие и социально психологические теории, описывающие и объясняющие человеч. поведение и социальную реальность через взаимодействие между людьми. Элементы Т.в. содержались в социологии Зиммеля, феноменологии Гуссерля и… … Энциклопедия культурологии

- (колиинфекции) заболевания, обусловленные бактериями рода Escherichia (см.). Облигатные энтеропатогенные варианты кишечной палочки вызывают специфическое заболевание колиэнтерит(см.). Клин, картина Э., обусловленных условно патогенными кишечными… … Словарь микробиологии

Общежитейский и науч. термин, обозначающий: 1) человеч. индивида как субъекта отношений и сознат. деятельности (лицо, в широком смысле слова) или 2) устойчивую систему социально значимых черт, характеризующих индивида как члена того или… … Философская энциклопедия

Т. п. была создана Куртом Левином, считавшим, что для понимания поведения необходимо принимать во внимание всю ситуацию целиком, т. е. гештальт ситуацию. Левин распространил свои идеи на новые области, взяв за образец мышления мат. построения… … Психологическая энциклопедия

— питательная среда для выделения, подсчета и различия грамотрицательных микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae.

В состав среды входят:

• пептон
• Калия фосфат
• лактоза
• Эозин Y
• Метиленовый синий
• Агар-агар

Среда имеет pH около 7 и сохраняется в темноте. Готовая среда имеет красновато-сиреневое окраски, неопалесцирующий с зеленоватым оттенком и легким преципитатом, если в чашках Петри формируется гель.

Эта среда разработана американским микробиологом Левином (Levine) и используются для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а также для быстрой идентификации грибов Candida albicans. Американские микробиологи рекомендуют это среда для выделения, подсчета и розрзнення грамотрицательных микроорганизмов кишечной (колиформные) группы. Метиленовый синий и эозин в определенной степени подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Эти красители служат в качестве индикаторов расщепления лактозы. На этой среде могут расти в виде точечных колоний дрожжи и некоторые грам-положительные бактерии, например, энтерококки.

Микробиолог Велд (Weld) предложил использовать агар Левина с добавлением хлор-тетрациклина гидрохлорида для быстрой идентификации грибов Candida albicans в клиническом материале. Выявление этих грибов в таком материале, как фекалии, оральный и вагинальный секрет, ногти, чешуйки кожи и другое возможно через 24-48 часов при инкубации при 35-37 ° С в атмосфере, содержащей 10% углекислого газа. Однако культуральные свойства грибов при этом варьируют.

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37 ° С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС) Рост

Escherichia coli (25922) Обильный

Pseudomonas aeruginosa (27853) Обильный

Salmonella typhimurium (14028) Обильный

Candida albicans (10231) Хороший или обильный (в атмосфере с 10% углекислого газа)

Enterobacter aerogenes (13048) Хороший

Staphylococcus aureus (25923) Слабый или отсутствует

Saccharomyces cerevisiae (9763) Слабый или отсутствует

Enterococcus faecalis (29212) Подавляется

Практика

Плотные среды

Висмут-сульфит агар

______________________________________________

Паратиф А Сальмонеллез

Готовая среда непрозрачна зелено-горохового цвета. Строго селективная среда для выделения чистых культур сальмонелл. Salmonella typhi, Salmonella enteritidis и Salmonella typhimurium обычно образуют на этой среде черные колонии с металлическим блеском, окруженные зоной почернения в результате продукции сероводорода и восстановления сульфита до сульфида железа, имеющего черный цвет. Salmonella paratyphi A образует светло-зеленые колонии.

Эталон ответа: На плотной среде «Висмут-сульфит агар» обнаружены мелкие колонии. Гладкие с ровным краем, темные и непрозрачные с металлическим блеском.

______________________________________________

Среда Левина

Эталон ответа: На данной среде – среде Левина обнаружены мелкие гладкие колонии с ровным краем сине-фиолетового цвета с металлическим блеском, с ферментированием лактозы до кислоты. Индикатор – метиленовая синька. Предварительный диагноз – колиэнтерит, вызванный кишечной палочкой - Escherichia coli .

Эталон ответа: Данная среда – среда Левина, сделанная с целью получения изолированных колоний. На среде обнаружены мелкие гладкие прозрачные неокрашенные колонии, и ферментирование лактозы – отсутствует. Преддиагноз – дизентерия, вызванная возможными возбудителями:

Серогруппа A: Shigella dysenteriae (10 сероваров)

Серогруппа B: S. flexneri (6 сероваров и подтипы)

Серогруппа C: S. boydii (15 сероваров)

Серогруппа D: S. sonnei (1 сероваров)

______________________________________________

Среда Эндо

______________________________________________

Эталон ответа: Данная среда является средой Эндо. На ней обнаружены мелкие бесцветные, прозрачные, гладкие с ровным краем колонии. Разложение лактозы до кислоты отсутствует, о чем говорит данные цвет среды. Использован индикатор Андраде. Предполагаемый диагноз – брюшной тиф, вызванный Salmonella Typhi .

Эталон ответа: Данная среда используется для накопления изолированных колоний. Среда – Эндо. Обнаружены мелкие гладкие с ровным краем, красные с металлическим блеском из-за разложении лактозы до кислоты с использованием индикатора Андраде. Предварительный диагноз – колиэнтерит, вызванный кишечной палочкой - Escherichia coli .

______________________________________________

Методы определения чувствительности к антибиотикам

______________________________________________

Эталон ответа: В чашке Петри представлен метод определения чувствительности к антибиотикам – метод бумажных дисков, при котором на поверхность агара в чашке Петри наносят бактериальную суспензию и затем помещают диски, содержащие определенное количество антибиотика. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. После инкубации чашек в термостате при температуре 35 о -37 о С в течение ночи учитывают результат путем измерения диаметра зоны вокруг диска в миллиметрах.

Выделенная культура высоко чувствительна к мономицину, диаметр к задержке роста равен 30 мм, неомицина – 26 мм, канамицина – 20, а левомицитина – нет вообще. Характерно для кишечной палочкой - Escherichia coli .

______________________________________________

Посев из воздуха

______________________________________________

Эталон ответа: На данном пластинчатом агаре произведен посев из воздуха седиментационным методом. Показанием загрязненности воздуха закрытого помещения является общее количество бактерий на 1 кубический метр. Определяется количество бактерий за 10 минут. Для этого чашку Петри с пластинчатым МПА оставляют открытой на воздухе в течение 10 минут, затем инкубируют в термостате при температуре 37 градусов, сутки. Результаты подсчитывают по суммарному количеству колоний. Норма в операционной перед операцией равна – 3-5 колонии. После – 15. Также существует аспирационный метод, где воздух оценивают специальным прибором Кротового.

______________________________________________

Смесь микроорганизмов

______________________________________________

Цветной ряд

______________________________________________

Дизентерия

______________________________________________

МПБ (для опред протеолитических св-в): H2S-; Индол-;

Маннит: Кислота+; Газ-;

Мальтоза: Кислота+; Газ-;

Среда Пешкова: рост по уколу, цвет изменился в красный, что говорит о ферментации маннита до кислоты. Индикатор – Андраде;

______________________________________________

Кишечная палочка

______________________________________________

МПБ (для опред протеолитических св-в): H2S+(почернела); Индол+(покраснела);

Глюкоза: Кислота+; Газ+;

Лактоза: Кислота+; Газ+;

Мальтоза: Кислота+; Газ+;

Сахароза: Кислота-; Газ-;

Среда Пешкова: помутнение всего столбика (культура подвижна), цвет изменился в красный, что говорит о ферментации маннита до кислоты и наличие пузырьков газа. Индикатор – Андраде;

Среда Ресселя (Индикатор – бромтимоловый синий): Скос и столбик имеет желтый цвет, а в толще – газ, что свидетельствует о разложении лактозы и фруктозы до газа и кислоты.

Брюшной тиф

______________________________________________

Среда Гисса (Индикатор – водно-розоловый):

Глюкоза: Кислота+; Газ-;

Мальтоза: Кислота+; Газ-;

Маннит: Кислота+; Газ-;

Лактоза: Кислота-; Газ-;

Сахароза: Кислота-; Газ-;

Среда Пешкова: помутнение всего столбика (культура подвижна), цвет изменился в красный, что говорит о ферментации маннита до кислоты. Газ – отсутствует. Индикатор – Андраде;

______________________________________________

Сальмонеллез

______________________________________________

МПБ (для опред протеолитических св-в): H2S+(почернела); Индол-;

Среда Гисса (Индикатор – водно-розоловый):

Мальтоза: Кислота+; Газ-;

Сахароза: Кислота-; Газ-;

Среда Пешкова: помутнение всего столбика (культура подвижна), цвет изменился в красный, что говорит о ферментации маннита до кислоты и газа. Индикатор – Андраде;

Среда Ресселя (Индикатор – бромтимоловый синий): Скос имеет неизмененный цвет, а столбик - желтый цвет. В толще – газ, что свидетельствует о разложении фруктозы до газа и кислоты, лактоза – неферментированна.

______________________________________________

Газовая гангрена

______________________________________________

Среда Китта-Тароцци: жидкая среда для культивирования анаэробов. Для ее приготовления нарезанную мелкими кусочками печень (мясо) заливают трехкратным количеством МПБ, кипятят 30 мин, фильтруют. Просушенные кусочки печени раскладывают (для адсорбции кислорода) в пробирки и заливают бульоном. Стерилизуют при 120°С в течение 30 мин. Перед использованием прогревают и заливают стерильным нейтральным парафиновым маслом.

На данной среде обнаружен рост в виде помутнения. Также есть газообразование.

______________________________________________

Ботулизм

______________________________________________

Среда Вейнберга: полужидкая питательная среда, применяемая для культивирования патогенных анаэробов, представляющая собой мясопептонный бульон, содержащий 1% агара и 0,2% глюкозы;

В столбике сахарного агара обнаружены мелкие, дискообразные, пушинчатые колонии. Среда разорвана из-за повышенного образования газа при ферментации глюкозы.

Производят распил. Пастеровской пипеткой или иглой берут часть колоний и помещают в среду Китта-Тароцци, для накопления.

______________________________________________

Реакция агглютинации (развернутая)

______________________________________________

NB!: Друзья, не забываем, что читать реакции нужно с конца – проверка контроля сыворотки и антигена. После у вас, скорее всего, спросят определение титра агглютинирующей сыворотки (макси­мальное разведение сыворотки, при котором происходит агглютинация с соответствую­щим микроорганизмом ) и титра диагностической сыворотки (титр антител к конкретному возбудителю болезни в сыворотке крови, выявляемый у больных и не наблюдающийся у здоровых людей ).

Эталон ответа: Данная реакция представляет собой развернутую реакцию агглютинации. Контроль сыворотки представлен в виде прозрачной жидкости и является отрицательным. В контроле антигена – помутнение, тоже отрицательный. Смотрим разведение 1/100 – прозрачная с зонтиком на дне, при встряхивании - хлопья, значит реакция положительная. И так до 1/6400 . Смотрим разведение 1/12800, заметно помутнение – реакция отрицательна.

Следовательно, реакция агглютинации положительна до разведения 1/6400, при отрицательных контролях, значит титр исследуемой сыворотки - 1/6400.

Реакция агглютинации - склеивание корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов - натрия хлорида.

______________________________________________

Реакция связывания комплимента

______________________________________________

РСК основана на активации комплемента комплексом антиген-антитело.

Проходит в две стадии:

Инкубация смеси: антиген+антитело+комплемент

Индикаторная: выявление одного комплемента путем добавления гемолитической системы (эритроциты барана+гемолитическая сыворотка в тройном титре)

Эталон ответа: Произведен учет РСК с сыворотками больных 1 и 2 для выявления в них антител к соответствующему антигену. Реакция с сывороткой больного 2 – отрицательна, так как в первой стадии антитело и антиген не подошли друг другу и не связались, а значит они и не связали комплемент. Тогда свободный комплемент соединяется с гемолитической системой и происходит лизис. В сыворотке больного 1 обнаружена задержка гемолиза, значит комплекс «антитело+антиген+комплемент» образовался. Комплемент связан и не присоединяется к гемолитической системе. Гемолиз отсутствует. Диагноз положительный.

______________________________________________

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации

______________________________________________

В РНГА выявляют антитела сыворотки крови с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума , который представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами.

РПГА ставят в пластиковых планшетках или в пробирках с разведениями сыворотки крови больного, к которым добавляют эритроцитарный диагностикум.

Эритроциты (или частицы латекса) с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки крови, что вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде пуговки.

Цена: 2 970.00 RUB

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Производитель: Оболенск

Страна: Россия

Ед. изм.: кг

Вид упаковки: полиэтиленовая банка

Артикул: О9

Описание

Питательная среда Левина-ГРМ с эозинметиленовым синим для выделения патогенных и условно патогенных энтеробактерий из исследуемого материала, их дифференциация по признаку ферментации лактозы. На среде так же можно выделить коагулазоположительных стафилококков. Эозин и метиленовый синий придают селективные свойства. В виде сухого порошка, фасовки 250 гр достаточно для приготовления 6,6 л плотной агаровой среды

Дифференциально-диагностическая селективная среда, принцип действия основан на способности некоторых бактерий к ферментации лактозы с образованием продуктов, смещающих рН в кислую сторону, и как следствие изменение цвета комплекса индикаторов, окрашивающих колонии кислотообразующих бактерий в темно-фиолетовый цвет. В результате культивирования получается четкая дифференциация в виде изолированных единичных колоний: лактозоотрицательные образуют прозрачные или полупрозрачные бесцветные колонии с возможной незначительной пигментацией, например, Staphylococcus aureus, Shigella flexneri. Лактозоположительные энтеробактерии формируют непрозрачные от светло-сиреневого до фиолетового цвета с зеленоватым металлическим блеском или без него, в частности у E. coli

Состав среды: панкреатический гидролизат рыбной муки, дрожжевой экстракт, лактоза, натрий фосфорнокислый двузамещенный, натрий хлористый, эозин-Н, метиленовый синий, агар.
В виде гомогенного сухого, легко растворимого порошка светло-сиреневого цвета.
Готовая среда прозрачная, от светло-сиреневого до красновато-коричневого цвета.
Кислотность среды: при 25°С имеет рН 7,2 ± 0,2.
Готовую среду можно использовать в течение первых трех дней при температуре хранения +2...8°C в темном месте.
Форма выпуска: сухой порошок в полиэтиленовых банках по 250 г.
Условия хранения: в герметично закрытой упаковке в сухом защищенном от света месте при температуре +2...30°C.
Срок годности - 2 года с даты производства, указанной на упаковке.
Регистрационное удостоверение № ФСР 2008/03063

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Размешать 37,5 г порошка М022 или 27,5 г порошка М301 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить соответствующий углевод к Основе агара Левина (М301) перед стерилизацией. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. НЕ ДОПУСКАТЬ ПЕРЕГРЕВАНИЯ СРЕДЫ. Остудить до 50°С и встряхнуть для окисления метиленового синего (чтобы восстановить его синий цвет и размешать хлопьевидный преципитат). Если среда используется в тот же день, ее можно не автоклавировать.

Предупреждение : среду надо хранить в темноте, чтобы не допустить ее окисления на свету.

Эта среда разработана Levine (1, 2) и используется для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes , а также для быстрой идентификации грибов Candida albicans . Американские специалисты рекомендуют эту среду для выделения, подсчета и дифференциации грамотрицательных микроорганизмов кишечной (колиформной) группы (3, 4, 5).

Метиленовый синий и эозин в определенной степени подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Данные красители служат в качестве дифференцирующими индикаторами ферментации лактозы. На этой среде могут вырастать в виде точечных колоний дрожжи и некоторые грамположительные бактерии, например, энтерококки. Weld (6, 7) предложил использовать агар Левина с добавлением хлортетрациклина гидрохлорида для быстрой идентификации грибов Candida albicans в клиническом материале. Обнаружение этих грибов в таком материале, как фекалии, оральный и вагинальный секрет, ногти, чешуйки кожи и другом возможно через 24-48 ч инкубирования при 35-37°С в атмосфере, содержащей 10% углекислого газа. Однако культуральные свойства грибов при этом варьируют.

Гомогенный сыпучий светло-лиловый порошок.

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Готовая среда имеет красновато-лиловую окраску, опалесцирует с зеленоватым оттенком и легким преципитатом, если в чашках Петри формируется гель.

При 25°С водный раствор М022 (3,75% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2, водный раствор М301 (2,75% вес/об) имеет рН 7,3 ± 0,2.

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35-37°С.